化学发光免疫分析(CLIA)是一种将免疫反应与化学发光分析系统相结合的技术,用于检测蛋白质、激素、抗体和其他生物分子。它依赖于抗体与抗原的结合特异性,其基本原理是通过化学反应产生光信号,然后利用光检测器件将光信号转换为电信号进行分析。

  主流发光技术有直接化学发光和间接化学发光。直接化学发光是用化学发光底物(如鲁米诺、吖啶酯类化合物等)直接标记抗原或抗体,被标记的抗原或抗体与待测样品中的抗原或抗体相结合形成复合物,在加入反应试剂后被激发发光。

化学发光免疫分析的直接发光

  间接化学发光是用酶(如辣根过氧化物酶HRP或碱性磷酸酶AP)标记抗原或抗体与待测样品的抗原或抗体结合形成复合物,复合物上的酶再作用发光底物(如鲁米诺、AMPPD)进行发光。

化学发光免疫分析的间接发光

  化学发光免疫分析仪由进样系统、反应系统、信号检测系统和数据处理与输出系统组成。化学发光反应中发射光的波长与反应方法有关,大致为三种:425nm(鲁米诺体系)、470nm(AMPPD体系)和620nm(电化学发光体系)。可采用相应波长的PIN光电二极管将化学反应产生的光信号转化为电信号。

化学发光免疫流程图

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